定制合成 Custom synthesis
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肽/半抗原必须耦合到载体蛋白(KLH,BSA,OVA),才可以获得高效的抗体。一般来说,多肽可以与蛋白偶联的条件如下:.半胱氨酸上的-SH是目前最优质的可用于与载体蛋白偶联的基团。目前我公司提供高质量的偶联载体蛋白(KLH,BSA,OVA)。有一个自由的氨基或羧基,也可以作为偶联用化学基团,单专一性/选择性不如巯基
多肽偶联简介:原则上必须要同时照顾好载体蛋白/多肽的稳定性,不能破坏任何原有化学结构,反应条件还要温和;而且后期基本都是生物学实验或动物实验,有机溶剂是存在的越少越好。由于主要参与物为蛋白及多肽等生物制品,而且使用的途径也是生物途径,所以必须在温和的类生物buffer体系进行反应(PBS,CBS等)。考虑到多肽的复杂化学环境,多基团,多侧链,所以常规蛋白偶联选择的方法就比较有限,要尽量少的避免各类复杂的副反应,反应条件还需要温和。
目前常用的三种载体蛋白:KLH 匙孔血蓝蛋白,BSA 牛血清白蛋白,OVA卵清蛋白(鸡蛋清脱盐)。另外还有HAS人血清白蛋白等
。
之所以选择以上的载体蛋白,是已经验证过序列中含有较高比例的赖氨酸且亲水性较好,甚至在某些有机溶剂中都能有较高的溶解及可反应性。
在遵循以上原则的情况下,常用的三种偶联官能团:Cys-SH巯基,主侧链-NH2,主侧链-COOH。
激活剂:
-SH常用MBS/SMCC,或者对应的磺酸化原料。其结构基本都是N-羟基琥珀酰亚胺跟马来酰亚胺的双功能结构化合物。
我们现在使用的巯基偶联激活剂是Sulfo-SMCC,sulfo代表磺酸化是一种增加试剂水溶性的手段(不影响偶联过程中主要的化学反应),客户总会问MBS/SMCC的区别,如下是各自的结构图:
SMCC: MBS: arm length 7.3A
Sulfo-SMCC: sulfo-MBS:
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