多肽合成

一、为什么要追求新的肽合成办法

酰胺键构成是有机合成中最常用的反响之一，也是在制药工业中停止的最常用的药物化学反响。遗憾的是，所触及的反响条件都特别糜费试剂并因而对环境有害，同时反响过程中也可能存在平安隐患。

至今仍运用的有毒性的溶剂有：二甲基甲酰胺（DMF）、N-甲基-2-吡咯烷酮（NMP）和二氯甲烷（DCM）。所以寻求更环保的有机溶剂不断是一个抢手话题，特别是关于溶剂耗费多，逐渐反响的固相多肽合成研讨。而水（自然肽生物合成培育基）的运用对有机化学家来说是一个应战，主要是出于溶解性缘由。

今天引见一种新型的合成肽的办法：运用少量的外表活性剂TPGS-750-M在室温下在水中制备多肽，从而取代有机溶剂作为反响介质。关于简单偶联，肽合成的时间通常需求3-4小时，关于两步去维护加偶联过程通常需求8小时。反响后可经过简单的萃取和酸性/碱性水洗濯来拿到最终的肽。下面引见下此类反响。

（胶束中的肽合成由TPGS-750-M-H2O组成）-固拓生物

二、引见Cbz-L-Ala-L-Phe-L-Leu-OEt（II-1）和Cbz-L-Lys（Boc）-L-的肽合成制备过程

我们选择了Cbz-L-Ala-L-Phe-L-Leu-OEt（II-1）和Cbz-L-Lys（Boc）-L-的肽合成制备。 Pro-L-Val-OMe（II-2）作为α-MSH-13的C-末端三肽局部的前体，以其抗炎作用而出名。

证明了两个阶段：二肽前体Cbz-L-Phe-L-Leu-OEt（I-1）和Cbz-L-Pro-L-Val-OMe（I-2）的制备及其一锅法去维护/与第三种被维护的氨基酸（分别为Cbz-LAla-OH和Cbz-L-Lys（Boc）-OH）偶联。通常偶联浓度较高并充沛搅拌，产率也会更高。

1，第一步 二肽前体的制备：Cbz-L-Phe-L-Leu-OEt（I-1）和Cbz-L-Pro-L-Val-OMe

在2％（wt / wt）TPGS-750-M-H2O中合成的两种代表性二肽的反应途径）

二肽的制备描绘了两种前体Cbz-L-Phe-L-Leu-OEt（I-1）和Cbz-L-Pro-L-Val-OMe（I-2）的合成，运用茚三酮经过薄层色谱（TLC）定性检测游离胺的消逝。偶联反响通常在1小时内完成。一切副产物都可溶于水，因而纯化只需用甲基叔丁基醚（MTBE）或EtOAc停止简单萃取，然后停止酸性和碱性水洗濯。假如二肽直接用于两步一锅去维护/偶联序列，则不需求进一步纯化。关于最终产品，经过二氧化硅垫的快速过滤消弭了一切剩余的TPGS-750-M的痕迹，产生所需的纯肽。该办法适用于普遍的氨基酸、脂族胺或脂肪酸，并且已证明在克级范围上有效，提供类似的产率。不过有甘氨酸参与的肽合成，通常产率会偏低些，可能是由于溶解性较差的缘由。，但是它们的合成能够经过共溶剂来改善。为了放大和工业目的，激烈引荐运用10％（体积/体积）的共溶剂（例如THF）以更好地处置反响。

2，第二步 上述二肽和N-维护的氨基酸继续反响，构成三肽

三肽的合成-固拓生物

三肽的制备在该办法中，将制备的Cbz-二肽I-1和I-2用Pd / C和H 2气体脱维护。最初的脱维护反响通常需求约2小时才干完成，并且能够经过TLC监测。需求1当量的HCl构成铵盐并避免催化剂中毒。在氩气放射以释放氢气之后，然后能够运用优化的偶联办法，在反响容器中参加下一个N-维护的氨基酸/肽，同时添加另一局部2％（wt / wt）TPGS-750-M- H2O溶液将总浓度降低至0.25M。选择运用亲脂性的羧基苄基（Cbz），这增加了氨基酸在胶束中心内的溶解度。此外，运用该维护基可使其脱维护过程中，仅产生甲苯和CO 2副产物，使后续步骤不受影响。在可能存在溶解度问题的状况下，特别是当所得产物是固体时，添加10％（体积/体积）THF可有助于改善反响混合物的产率和处置。最终产物用乙酸乙酯（EtOAc）萃取，萃取物经过硅藻土过滤以除去Pd / C。在酸性和碱性水洗濯之后，我们在硅胶柱上停止纯化，得到所需的三肽，产率高。该办法可十分有效地取得高产量的短肽。

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