定制合成 Custom synthesis
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研究多肽结构的主要目的是说明其氨基酸组成和序列是否正确,如果多肽分子中含有胱氨酸,则应明确其状态(氧化状态或还原状态),确定含有多种半胱氨酸的多肽的正确二硫键连接位置。对于一些长肽,可能还需要利用核磁共振、圆二色谱等方法研究其空间结构(如二、三级结构)。
对于短肽,元素分析、红外光谱、核磁共振光谱、氨基酸构成分析、光谱等常用方法有时足以说明结构特征。如果从上述测试中获取的信息难以合理分析和分配,则应进行氨基酸测序。
中、长肽应对氨基酸组成和氨基酸序列进行分析。氨基酸序列的一般方法是Edman分解,这是测定N-末端氨基酸的化学方法。基于快速原子轰击、电喷雾、现场分析和激光分析质谱等多种技术的质谱技术可以提供多肽分子量和序列信息,是Edman分解的良好补充。
对于含有20多个氨基酸残基的肽,如果不能直接确定其序列,可以根据肽的分子量和氨基酸构成的特点,利用特定的蛋白水解酶将其分解成小段,分析各段的序列。
肽含有非天然氨基酸和氨基酸衍生物时,必须在结构研究中确认。这个时候在相应的研究中研究这些非天然氨基酸和氨基酸衍生物的配方行为。
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