多肽合成

怎样溶解多肽

多肽的溶解性非常大水平上在于多肽的极性。酸性的蛋白质溶解于碱性溶液，而偏碱蛋白质能溶于酸性溶液，带有很多没有正电荷的极性氨基酸残基或疏水性碳水化合物的疏水性多肽和中性多肽可先溶解于少量有机溶液中，如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、乙醇、丙醇或等保，随后放水（纯净水）稀释液。必须留意的是，带有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不能用DMSO溶解，由于DMSO很有可能导致主链空气氧化。

溶解性检测的重要性

在不确定性某条肽链的溶解性，为了更好地防止出现多余的损害。小剂量地开展多肽溶解检测是很必须的。在没有危害多肽理化性质的前提条件下，必须检测不一样的溶剂，直至寻找最适当的一种。超声解决有利于粉碎颗粒并提升溶解性。（留意：超声解决会造成溶液发热和多肽溶解，因此时间不适合太长。）检测多肽溶解性并并不是沒有依据的随便采用溶剂。多肽序列本身的理化性质是迅速寻找适合溶剂的根据之一。有关多肽溶剂挑选：

1.

假如整篇肽所带正电荷是呈阳性的，表明该肽是偏碱的。可先试着用纯净水来溶解；如果不溶解水，然后试着用少量10%-25%醋酸溶解，假如依然不成功得话，加上一些TFA（10-50微升）来助溶，随后自来水稀释液至理想化浓度值。

2.

假如整篇肽所带正电荷是呈阴性的，表明该肽是酸性的。酸性的多肽能够试着用PBS（PH7.4）来溶解，如果不溶得话，加上少量的碱性溶剂，如0.1M的硝酸钾，随后放水稀释液至理想化浓度值。带有分散半胱氨酸的多肽应溶解减压蒸馏的酸性缓冲溶液中，由于当PH值超过7时，巯基会被快速空气氧化成二硫化物。

3.

假如整篇肽正电荷是零，表明肽是中性的。中性肽一般溶解有机溶液。最先，试着加上少量乙腈、乙醇或等保。针对高宽比亲水性的多肽，可应用少量的二甲基亚砜溶解，随后自来水稀释液至理想化浓度值。针对带有随意半胱氨酸的肽，需应用DMF而不是DMSO。针对有集聚趋向的肽，可加上5M盐酸胍或8M尿素溶液，随后开展必需的稀释液。

填补：

将每一个酸性氨基酸取值为－1，包含天冬氨酸（D）、磷酸（E）、及其羧基尾端-COOH。每一个碱性氨基酸取值为＋1，包含精氨酸（R）、磷酸氢钙（K）、组氨酸（H）及其羟基尾端-NH2。随后测算全部多肽的电荷数。

碱性氨基酸：K,R,H,N-terminus

酸性氨基酸：D,E,C-terminus

极性中性碳水化合物：F,I,L,M,V,W,Y

非极性亲水性碳水化合物：G,A,S,T,C,N,Q,P,酰胺基，酰胺基

举例子：

RKDEFILGASRHD:(+5)+(-4)=+1觉得是偏碱多肽，

EKDEFILGASEHR:(+4)+(-5)=-1觉得是酸性多肽，

AKDEFILGASEHR:(+4)+(-4)=0觉得是中性多肽，

提议：为了更好地避免或尽量避免多肽溶解，请将多肽以冻干粉方式储存在-20°C，-80°C更好。假如必须储存溶液肽，最好是分为样品储放，以防止不断冻融。一份样品融冻后未用完，应丢掉。病菌溶解有时候会变成 溶液肽的不便，因此请将肽溶解无菌水或肽溶液过虑杀菌。

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