多肽合成

使用多肽的关键条件之一便是多肽的溶解性，各个氨基酸的物理特性都是不同的；如赖氨酸、组氨酸、精氨酸是亲水性的，但亮氨酸、异亮氨酸、颉氨酸则是疏水性的。因为其组成不同，各个多肽具有不同的溶解性。

1．我们合成的多肽溶解性如何？

多肽的溶解性及合适的溶剂我们难以精确推断，更不能认为是多肽合成的问题造成多肽难以溶解；最好的办法是从多肽序列中判断多肽的溶解性。

2．如何从多肽序列中判定多肽的溶解性？

（1）多肽中假如带有高比例的疏水性很强的氨基酸如Leu,Val,Ile,Met,Phe 和 Trp，多肽很难与水性溶液溶解乃至根本不可能溶解。这种氨基酸不管是纯化或合成，都有可能有问题。

（2）一般来说疏水性氨基酸的比例<50%,无法连续5个连续aa为疏水性，带电荷的氨基酸的比例达到20%，可以通过在多肽的N或C短添加极性氨基酸来改善溶解性。

3．如何溶解多肽？

通常难以短时间选择合适的溶剂，一般是先取一些试一试，在没有选择合适的溶剂前切忌全部溶解。

如何选择合适的溶剂？

第一步设定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH为-1，判断多肽的电荷特定；碱性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2为+1，其他氨基酸的电荷为0。计算出净电荷数。

①如果净电荷数>0，多肽为碱性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸（10%以上）；如果多肽还不能溶解，加入少量 TFA(25ul)溶解，最后加入500ul水稀释。

②如果净电荷数<0，多肽为酸性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然后加入500ul水稀释。

③如果净电荷数＝0，多肽为中性，一般需要用有机溶剂如乙腈，甲醇或异丙醇，DMSO等溶解。疏水性很大的多肽适合用尿素来溶解。

写到最后:

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