定制合成 Custom synthesis
联系方式 Contact Us
在多肽合成中,不仅要保护暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基,同时也需要保护氨基酸侧链上的活性基因,在完成反应后再去除保护基因,才能使具有特定氨基酸顺序的多肽合成成功。
由于不易发生消旋,因此无论固相合成还是液相合成,α氨基的保护基均采用烷氧羰基类型。苄氧羰基最先使用,然而因为其想要脱除必须有较强的酸解条件,因此使用叔丁氧羰基替代来保护,采用TFA脱保护,可是对于含有色氨酸等对酸不稳定的肽类的合成不适用。
Fmoc在changMeienlofer和Atherton等人在1978年被采用作为α氨基保护基,Fmoc基对酸很稳定,可以使用哌啶-CH2CL2或哌啶-DMF将其脱去,最近几年,Fmoc合成法的应用越来越广泛。
羧基一般使用形成酯基的方法来保护,甲酯和乙酯在逐步合成保护羧基的过程中最常用,因为皂化可以将它们去除。在合成肽时,为了避免侧链功能团所带来的副反应,通常使用适当的保护基暂时保护含有半胱氨酸、组氨酸、精氨酸等带侧链功能基的氨基酸的侧链基团。
保护基的选择不仅要能够让侧链基团不参与形成酰胺的反应,还要保证在肽合成过程中保护基不受破坏,然后在肽链裂解时将保护基去除。例如用金刚烷氧羰基(Adoc)对精氨酸进行保护,用冷的三氟乙酸将其脱去;用2,2,2-三氟-1-苄氧羰基和2,2,2-三氟-1-叔丁氧羰基乙基来对组氨酸的咪唑环进行保护,然后通过催化氢化或冷的三氟乙酸将其脱去。
固相中和液相中的接肽反应原理大体上相同,在溶液内放入两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸,没有肽键形成。酰胺键的形成,一般使用强的失去剂(如碳二亚氨)形成对称酸酐或者活化羧基变成混合酸酐、活泼酯、酰氯等方法。当中最为广泛应用的是活化酯法和选用DCC、HOBT或HOBT/DCC的对称酸酐法。
裂解及合成肽链的纯化BOC法是用TFA+HF裂解和脱侧链保护基,FMOC法是直接用TFA,由于条件不同,有些时候也会采用氟离子和氢解、光解、碱等其它脱保护方法,一般采用GX液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等进一步的精制、分离与纯化合成肽链。
写到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。
原创文章如有转载,请注明出处“本文首发于固拓多肽合成生物科技有限公司(www.bluetickco.com)”
本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用 于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。
- 上一条:肽的活性和分泌周期
- 下一条:有哪些显色剂在多肽固相合成经常使用