多肽合成

多肽一级结构，二级结构鉴定是多肽分析鉴定的关键方法，多肽一级结构有氨基酸组成分析，质谱分析，氨基酸序列分析。二级结构包含：X-衍射，NMR，圆二色谱（CD）等。以下是合成多肽二级结构的分析鉴定和纯度分析。

合成多肽二级结构的分析：

X-衍射

X-衍射可以获得有关化合物晶型的直接信息和相对与构型。

核磁共振(NMR)

二维、三维以及四维NMR伴随分子生物学、计算机处理技术的发展而取得应用，这致使NMR逐步变为大分子结构物质分析的主要方法之一。NMR能够用确定来氨基酸序列、分布以及构象。到现在为止，NMR能够十分精确且快速地取得分析结果，这对分子中不超郭30个氨基酸的小肽的有非常大的分析作用。

圆二色谱（CD）

要想获得生物大分子的二级结构，圆二色谱需对蛋白质等生物大分子的圆二色光谱进行测量，其快捷，简单，在酶动力学，蛋白质构象研究，蛋白质折叠等方面获得广泛的使用。是一种特殊的吸收谱。

肽链为圆二色谱紫外区间的主要生色团，这一波长范围的CD谱中含有生物大分子主链构象的数据。在220nm附近无规则卷曲构象的CD谱有一小而宽的正峰，198nm附近有一负峰；α-螺旋构象的CD谱在190nm附近有一正峰，在222nm、208nm处有一负峰。β-折叠构象的CD谱在195-198nm处有一强的正峰，在217-218nm处有一负峰。

纯度分析：

多肽的纯度分析往往都会使用HPLC办法，选取洗脱梯度，5%B--65%B，时长30min，RP-C18，颗粒直径5μm，孔径300A，4.6×150mm，流动相：A，0.1%TFA/H2O；B，0.1%TFA/ACN。有一部分短肽鉴于具有很强的亲水性，在C18上保留比较弱，就需要对条件进行调整，具体的办法有以下两种：

1.在流动相中添加七氟丁酸，十八烷基磺酸钠等强离子对试剂。

2.对分析梯度进行调整，要把起始梯度换成2%，等度或小梯度洗脱。

写到最后:

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