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二甲基亚砜(DMSO)是一个含硫的有机化合物,常温状态下为无色无味的透明液体。DMSO用作冷冻保护剂常常应用在细胞库。在细胞冷冻的时候,DMSO可避免胞内/胞外产生晶体,其使用浓度为10%。DMSO一般可与盐或血清蛋白相结合。
DMSO能够很轻易地溶解疏水性多肽。但DMSO可提升细胞的渗透性,若多肽在DMSO中溶解便会对细胞造成毒性反应。高浓度的DMSO千万不能使用在细胞培养中。浓度值为5%的DMSO就可以溶解细胞膜。大部分细胞株能够忍受0.5%DMSO,少量能够忍受1%的浓度,且不体现出明显的细胞毒性。可是原代细胞培养对其非常敏感。那么如果要用原代细胞做剂量/反应曲线(可行性),其浓度应小于0.1%。
对于一些疏水性很高的多肽,可认试着把它溶解在一定量的DMSO(30-50ul,100%)中,接着一滴一滴轻轻地把它加到不停搅拌的溶液如PBS或其它想要的缓冲液中,直到浓度满意。假如滴入的时候,肽溶液逐渐变混浊,证明已经接近溶解上限。此外,超声波有利于溶解多肽,不过在运用超声处理应注意超声波会造成溶液发烫进而造成多肽降解,因此一定要在冰上进行操作。
下面是一部分经验分享:
1、对绝大多数的细胞而言,浓度值为0.1%DMSO十分安全。
2、普遍应用于培养细胞的DMSO终浓度为0.5%,不会造成细胞毒性。
3、虽然对一部分细胞来讲,1%DMSO也不会造成细胞毒性,但更推荐0.5%。
4、也有5%DMSO出色地用于某一些细胞的例子。
5、一直保持终浓度在0.5%,但存放的时候可以200倍高浓度溶解于100%的DMSO中。
写到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。
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