定制合成 Custom synthesis
联系方式 Contact Us
多肽常用树脂,多肽树脂切割,多肽树脂厂家,多肽树脂取代度,多肽树脂用量计算,多
肽树脂过滤操作
Wang-resin
多肽固相合成中常用的树脂是羟基,第一种氨基酸通过酯键与树脂的Linker连接。因此,偶联条件比酰胺键更强,需要DMAP催化。氨基酸特别容易消旋,因为DMAP具有很强的碱性,(Cys,His)不适用于Wang-resin,这个时候建议使用CTC-resin。
另外,当Wang-resin碳端二肽中含有Gly、Pro时,也要注意DKP的副反应(机制见下图)。N-端氨基酸脱Fmoc后,裸露出氨基,攻击前面的酰胺键或酯键,受影响的片段以二酮哌嗪的形式从树脂中脱落,最终导致收率下降。当Gly,Pro,N-烷基氨基酸在C-端前两个氨基酸中时,交替D/L型氨基酸时,会加速这种反应。当固定相的Linker类型为酯键时,这种副作用最为严重,因为羟基是比氨基更强的离开基团。这种副作用可以通过使用CTC-resin来抑制。
Wang-resin的linker相对稳定,需要高浓度TFA裂解。在高浓度TFA条件下裂解,Wang-resin的linker可能会出现不规则裂解,从而产生正离子1。如果肽链中有Trp残基,正离子可能会攻击Trp残基侧链的吲哚环引,从而产生M+106的杂质(机制见下图)。一般情况下,Wang-resin的linker在A处断裂,但当肽链中含有一些难以去除的侧链保护基时(例如Arg的侧链Pbf,DOTA环的羧基保护基tBu等),则必须采用更强的切割条件,此时Wang-resin的linker可能会出现不规则的裂解,在A和B处同时断裂,产生正离子1,这种离子特别容易攻击Trp侧链。使用CTC-resin可以完全避免这种副作用,如果必须使用Wang-resin,为了控制这种副作用,可降低切割温度,缩短切割时间。
CTC-resin
多肽固相合成中常用的树脂对水非常敏感。在装载第一种氨基酸时,不需要预活化,只需将氨基酸和DIPEA溶液加入树脂即可反应,因此在装载第一种氨基酸时,完全可以避免Wang-resin产生的消旋副作用。与此同时,CTC-resin的linker上的氯原子也能有效地抑制DKP副作用。
由于CTC-resin的linker不稳定,低浓度TFA可以使其分解,因此,在合成过程中,一些肽链可能会从树脂中脱落,从而降低收率。但由于这一特点,我们可以使用低浓度TFA分解肽树脂来获得多肽片段,这些片段可以完全保护侧链,用于多肽片段合成。
Rinkamide-resin
氨基是制备肽酰胺最常用的树脂。我们通常使用Rink amide-resin,氨基受到Fmoc的保护。在装载第一种氨基酸时,首先要去除Fmoc,然后进入正常的偶联洗涤脱保循环。Rinkamide-resin的linker相对稳定,需要高浓度TFA裂解,因此也会产生类似于Wang-resin的副作用(见下图)。若肽链中含有Trp残基,则应注意相似的副作用。
Sieber-resin
此种制备肽酰胺的树脂更贵,功能基团是氨基,就像Rinkamide-resin一样。我们通常使用Sieber-resin,氨基受到Fmoc的保护。在装载第一种氨基酸时,首先要去除Fmoc,然后进入正常的偶联洗涤脱保循环。不同之处在于,Sieber-resin的linker没有Rinkamide-resin那么稳定,C-端酰胺多肽片段可以通过低浓度TFA裂解肽树脂来获得侧链全保护。
写到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。固拓生物所有产品仅限科研使用,不得用于人体,如有违反,后果自负。
原创文章如有转载,请注明出处“本文首发于固拓多肽合成生物科技有限公司(www.bluetickco.com)”
本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用 于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。