定制合成 Custom synthesis
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在生物学的研究中,一般会使用序列较长的多肽,针对序列中含60个以上氨基酸的多肽,一般会采取基因表达及SDS-PAGE法来获取,不过此方法时间长,最终生成物分离效果不佳等,使固相法长肽合成技术成了一种需求。
长肽合成面临的挑战及解决方案
长肽合成中,我们始终面临着一个问题,即合成中伴随序列的增长,缩合反应空间位阻增大,想要反应彻底,需要调整反应时间;不过随着反应时间变长,其所产生的副反应也就越多,一部分缺残基的目标肽就继而形成。这种缺残基的肽链都是长肽合成环节中所产生的关键杂质。故此,长肽的合成环节中,我们必须攻克的关键难题是探究高品质的反应条件和反应方法,进而使氨基酸缩合反应开展的更全面更充分。另外减短反应时间,正因为反应时间越长,不可控的副反应相对也就越多,副产物就越来越复杂。因此,总结了以下三点:
可以采用微波合成法:针对合成过程中遇到的一部分不易整体缩合的氨基酸,可以采用微波法进行合成,这种方法成效显著,并且大大减少了反应时间,并减少了两种关键副产物的形成。
可以采用片段合成法:当一些多肽用常见合成方法合成很困难,并且不易纯化时,我们可以采用将多肽中某段的某几个氨基酸整体缩合以后当作一个整体缩合到肽链上,此方法也可以解决很多合成中出现的问题。
可以采用酰肼合成法:酰肼法合成多肽的方法是固相合成的N末端Cys多肽和C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键来实现多肽相连的方法。这种方法依据肽链中Cys的位置,将整个肽链分为多条序列分别合成,最终通过液相合缩反应得到目标肽,这种方法不但大大减少了长肽合成时长,并且明显地增加了最终生成物纯度,故此广泛运用于含有Cys的长链多肽的合成。
长肽纯化
长肽的特殊性不可避免而导致所得到的粗品肽组分繁杂,故此,针对长肽的HPLC纯化也是一个挑战;通过在amyloid系列多肽纯化环节中,汲取大量经验并成功用以长肽纯化,通过采用新型设备,多纯化体系混用,重复分离等经验手段,大幅提升了我们长肽纯化成功率。
写到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。
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