多肽合成

合成疏水性肽通常很困难。疏水区域的链间氢键导致肽链溶剂化不良并减慢反应速率。破坏这种氢键的措施通常可以显着提高粗肽的纯度和产量。

加热会破坏肽链之间的氢键，除了通常由于温度升高而观察到的速率加速之外，还导致反应速率增加。微波加热直接增加溶液内分子的振动，导致温度快速升高。温度快速升高可能导致超过所需温度。微波加热（图1A）加速肽合成 并提高粗肽的纯度。  快速常规加热（图 1B）虽然在微波加热一分钟内速度较慢，但在提高粗制“困难”肽的纯度和产量方面产生与微波加热几乎相同的结果。6  传统加热或微波加热也会加速容易外消旋的半胱氨酸和组氨酸残基的外消旋化。

偶联反应的微波、常规、梯度和延迟梯度加热的温度曲线

图1A 图1B 图1C 图1D

温度梯度上较慢的加热（图 1C 和 1D）也提高了粗肽的产量和纯度，但半胱氨酸的外消旋作用较少。树脂珠表面的肽链暴露于反应混合物中，在室温或温和加热下迅速反应，而外消旋化缓慢。通常 80-90% 的反应位点偶联发生在反应时间的前 2 至 4 分钟内。仅需要加热来加速其余位点的反应。如果加热导致 4% 的外消旋化，那么快速加热（如使用微波）将导致几乎所有肽发生约 4% 的外消旋化。通过梯度加热，外消旋作用仅影响在较低温度下尚未反应的 10-20% 的肽链。这导致非对映异构体杂质减少 80-90%。

通过微波和常规加热，半胱氨酸的加速外消旋化与偶联速率竞争，导致非对映异构体杂质的形成增加。在梯度加热中，大多数肽链在较低温度下反应，其中外消旋反应缓慢并且形成较少的非对映异构体杂质。在这一发现的基础上，我们允许耦合在室温下进行 2 分钟，然后开始温度梯度（图 1D）。通过这种延迟梯度程序，粗肽的产量和纯度最大化，并且半胱氨酸残基的外消旋化减少。

写到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、CY系列)同位素肽等。固拓生物所有产品仅限科研使用，不得用于人体，如有违反，后果自负。

原创文章如有转载，请注明出处“本文首发于固拓多肽合成生物科技有限公司(WWW.GOTOPBIO.COM)”